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    高速離心機在質(zhì)粒提取中的重要應(yīng)用

    更新時間:2018-05-07      點擊次數(shù):4869

      質(zhì)粒是基因工程中常用的運載體,擔負著將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細胞中的重要使命。高速離心機對從細菌中分離質(zhì)粒有非常重要的作用。以下是一實驗室質(zhì)粒提取的步驟,使用蜀科TD-20高速離心機進行操作:

     

    1、將擴增好的菌液重懸,轉(zhuǎn)入1.5mL離心管中;
    2、用質(zhì)粒小量抽提試劑盒,按說明書要求提取質(zhì)粒;
    3、細菌高速離心1min,*去除上清;
    4、加入250ulRB溶液,振蕩器充分懸浮細菌;
    5、加入250ulLB溶液。立即上下顛倒10次,使細菌裂解,室溫,放置2min;
    6、加入250ulNB溶液。立即上下顛倒10次,使之充分中和,室溫,放置2min;
    7、室溫,15000rpm,蜀科
    高速離心機離心15min;
    8、將吸附柱放入收集管內(nèi),離心得到的上清轉(zhuǎn)移吸附柱,室溫,15000rpm,蜀科高速離心機離心30s; 
    9、棄廢液,將吸附柱放入收集管,加入700uL WB溶液到吸附柱中,15000rpm,蜀科高速離心機離心30s;
    10、重復上一操作;
    11、將吸附柱放入干凈的1.5mL離心管中,加30-50uL預熱的Elution Buffer,室溫,放置2min,高速離心1min;
    12、樣品進行電泳檢測:1%瓊脂糖凝膠電泳,上樣量為2uL,紫外燈下觀察,明亮的帶為超螺旋形式,可以在一定程度上表明提取質(zhì)粒的純度。

      質(zhì)粒提取是基因工程基礎(chǔ)的一步,
    高速離心機的運用非常頻繁,蜀科高速離心機全系采用轉(zhuǎn)頭識別技術(shù),有效防止轉(zhuǎn)頭超速運轉(zhuǎn),保護機器和人員安全,技術(shù)性能位居*,歡迎選購!

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